T 细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法 ? 简述其原理和特点。
T 细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法 ? 简述其原理和特点。
发布时间：2025-06-07 14:07:37
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答案：T 细胞增殖实验常用 3 H-TdR掺入法和MTT法。前者是根据 3 H-TdR能掺入细胞合成的DNA中,细胞增殖水平越高,掺入的 3 H-TdR越多,细胞培养结束后,用液体闪烁仪测定样品中的放射活性,用于判断细胞的增殖状况。该法灵敏可靠,应用广泛,但需特殊仪器,并有放射性污染。后者是根据细胞增殖时可利用MTT作为细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的底物,形成褐色的甲瓒颗粒并沉淀于细胞内或细胞周围,甲瓒生成量与细胞增殖水平正相关。MTT法敏感性不如 3 H-TdR掺入法,但操作简单,无放射性污染。 细胞毒实验常用 51 Cr释放法、凋亡细胞检查法。前者是用Na 2 51 CrO 4 ,标记靶细胞,若待检效应细胞能杀伤靶细胞,则 51 Cr从靶细胞内释出,靶细胞被破坏越多, 51 Cr释放越多,用γ计数仪测定释出的 51 Cr放射活性,可计算出待检效应细胞的杀伤活性。后者是根据靶细胞被效应细胞杀伤后,可发生细胞凋亡、DNA断裂的原理,用琼脂糖电泳等方法测定细胞凋亡,用于效应细胞杀伤活性的判断。
